宁德铁皮保温工程 山东农业大学液体发酵系统

、液体发酵系统工夫打算宁德铁皮保温工程

具有温度、转速、氧气流量、空气流量、pH 、DO 、补料、消泡示及铁心，并配有机械消泡浆。

1、温度：自动铁心范畴：自来水温+5℃～ 5℃﹙±.2 ℃ ﹚示范畴： ～15 ℃

2、搅动转速：调速范畴5 ～1±5rpm

3、空气流量：示铁心范畴 ～ 1L/min

4、pH示铁心：2 ～12pH±.5﹙酸碱双向﹚

5、融解氧： ～15±2℅

6、补料、消泡蠕动泵各台

邮箱：215114768@qq.com

7、罐体总容积1L，联想压力2.kg/c㎡、责任压力2.kg/c㎡，联想责任温度131 ℃

8、灭菌法:手动铁心蒸汽消毒灭菌

9、功率：主机：3kw， 单相22v

1、气源：2 ～4kg/c㎡

11、蒸汽： 2 ～4kg/c㎡

二、管路讲明

该过程图中空气管路阀门的标号为“AXX”，蒸汽管路阀门的标号为“SXX”，冷却水管路阀门标号为“WXX”，冷凝水管路阀门标号为“VXX”，电磁阀标号为“CXX”，物料管路阀门标号为“PXX”，冷冻水管路标号为“CWX”，其它气体管路标号为“NXX”。

1、空气过火净化

来自空气压缩机的压缩空气经净化器（外接减压肃穆器、除水、除尘、空气予过滤器）干预发酵罐空气总管，空气流量计针阀A1、阀A2、单向阀、空气过滤器，阀A3到达反馈器内，尾气经阀VT1排出，本管路具有计量，净化作用。注：空气流量示的流量所以过滤器前的压力下的流量，不是步调情状下的流量。

2、蒸汽

2.1 蒸汽进夹套

蒸汽经阀S1干预夹套（上进），经阀V1排出冷凝水。蒸汽对培养基预热。

2.2 蒸气进反馈器

蒸汽经阀S2、单向阀、空气过滤器、阀A3干预罐内，由排气口铁心阀VT1排出。蒸汽对过滤器及空气管线消毒。

2.3 蒸汽逾越样阀及放料阀

蒸汽经阀S3干预取样阀，出阀P2排出冷凝水。

3、自来水

3.1 自来水进夹套

当电磁阀C1开时，自来水经自动注水阀、阀W1干预发应器夹套（下进），由夹套上口、阀W2、加热器、电磁阀C1排出；当电磁阀关闭时，夹套水经W2干预电加热器、轮回泵、单向阀干预夹套（下口），通过夹水套水的轮回，将加热器的热能带入夹套，通过夹套的换热加热发酵液。十分领导：温度自动前须对夹套注水。

3.2 自来水进排气冷凝器，自来水经阀W3干预排气冷凝器，对发酵尾气进行冷却尽可能减少培养基的水分挥发

4、冷却水（选配）（消毒后降温应先使用 自来水）

冷冻水经电磁阀C2干预加热器内盘管，对夹套轮回水进行冷却。

冷冻水经切换阀T2（关T1）干预自来水管线、经切换阀T4（关T3)复返冷冻水回路。

5、纯氧管线（选配）宁德铁皮保温工程

纯氧管线：纯氧干预流量计、电磁阀C3、割断阀A21干预空气过滤器。

纯氧流量退换：开C3、A21后退换流量计的退换手柄。

6、空气流量检测与铁心：

空气热质料流量计：与空气玻璃转子流量计并联装配且在热质料流量计前后装配割断阀。热质料流量计内通谈须保捏干燥尘，因此惟有在发酵过程中才开质料流量计的前后割断阀A11、A12，发酵完竣后应实时关闭A11、A12。（详备说高见热质料流量计的讲明书）

7、补氨水管线

氨水经电磁阀C4、割断阀A31、补料针干预发酵罐，电磁阀由铁心器铁心。

三、实罐灭菌操作

1、准备

1.1. 盖紧罐盖上多样罐盖，旋紧罐盖上压紧螺栓。

1.2. 标定pH、DO电，将电插入罐体侧面的传感器口并实时地锁紧螺母，确保装配恰当止压下传感器弹出伤东谈主。

1.3. 关紧发酵罐底阀P1，倒入培养基，调节PH值，旋紧接种口

注：氯离子对不锈钢会带来不成逆转的龙套，因此应避用盐酸溶液退换PH，如工艺上法避用盐酸，应铁心盐酸浓度不大于5 ℅且在添加过程中不得径直构兵不锈钢。

1.4. 关排气冷凝器进水W3，移去收支口的软管排尽冷凝水夹套中水

1.5.拿起过滤器使过滤器后的三通阀A3处于“S”位置。（S—消毒，F—发酵），

2、培养基预热

2.1 准备责任

预热启动蒸汽发生器及空气压缩机。

将铁心器中的温度铁心设定为手动。

开排气阀VT1，关闭其它统统阀门。

2.2 开排气阀VT1 ，开夹套冷凝水阀V1排夹套水，关闭其它阀门

2.3 启动反馈器搅动马达。调转速2 ～ 3Rpm

2.4 蒸汽进夹套：渐渐开夹套蒸汽阀S1蒸汽进夹套（着重：此时有眇小爆破声属精深，如声息过响则开阀的速率应降速）。待排水总口排出蒸汽时退换冷凝水阀V1，铁心蒸气排出量以有一丝蒸汽排出即可。并铁心夹套内压力不外.2Mpa。当培养基预热至98 ℃时，干预实罐灭菌操作，在培养基温度在8 ～ 9 ℃时不错适的降速升温速率，在本温度区域不错灭大部分的微生物。

2.5 蒸汽逾越样阀：开出料阀P2（关紧底阀P1），开蒸汽阀S3，蒸气干预取样阀内腔，当阀P2排尽冷凝水后应退换其开度，以一丝蒸汽排出即可。

3、实罐灭菌

3.1 过滤器消毒：（A或B任选种，次消毒或每五批用“A”种消毒，其余可用“B”种消毒）

A：外源蒸汽消过滤器：微开过滤器上排冷凝水阀V2、V12，开过滤器前蒸汽阀S2，蒸汽经过滤器干预反馈器，当冷凝水阀V2、V12出口冷凝水很少时，退换冷凝水阀以有一丝蒸汽排出为宜。当排气口有蒸汽排出或罐温达到1 ℃两分钟后，关闭排气阀VT1。退换蒸汽阀S2 ，保管过滤器前蒸汽压为.12 ～.16Mpa。当罐温达到1 ℃时，培养基中的溶氧接近。不错标定溶氧的点。

B：罐内蒸汽消过滤器：过滤器三通阀处于“S”位置。停搅动，微开过滤器上排冷凝水阀V2、V12，当有罐压时，罐内蒸汽经空气管罐内三通阀干预过滤器，进V2、V12排出冷凝水。当排气口有蒸汽排出或罐温达到1 ℃两分钟后，关闭排气阀VT1。退换冷凝水阀V2、V12以有一丝蒸汽排出为宜。当罐温达到1 ℃时，培养基中的溶氧接近，不错标定溶氧为点。如若升温速率相比慢不错开罐底阀P1，蒸汽干预发酵罐。

3.2 当达到预定温度或罐压，铁皮保温开排气阀VT1至有一丝蒸汽排出，关紧或微开夹套蒸汽阀S1，微开罐底阀P1（开阀时不雅察视镜处培养基翻动的变化，以有一丝的变化为亦），字据罐压 或罐温变化的趋势，实时调节蒸汽阀S2、S3。阀门退换宜微调应避大幅度开关。当反馈器罐压或罐温保管在预定的范畴内起始计时。

3.3 保温起始后，排气阀蒸气排量不宜太小，不然可能致液面以上的罐体部分尤其罐盖够不上消毒温度。

3.4 保温阶段应旋松接种口盖至有一丝蒸气冒出。

3.5 移种管线消毒（适用于多发酵）

在保温过程中开移种管线阀P3及受种阀前排水阀V4，保温完竣前关V3。

4、灭菌完成及降温（先开后关，后开先关）

4.1 保温完竣先旋紧接种口盖.旋紧罐底阀P1，再关紧取样器的蒸汽阀S3。抬起过滤器使三通阀A3处于S位置，关紧蒸汽阀S2，退换过滤器冷凝水阀以有微量排气为宜。

4.2  关夹套蒸汽阀S1、冷凝水阀V1，开夹套进水阀W1和轮回管线割断阀W2.在铁心器中将温度铁心式设定为“自动”并对温度进行设定，发酵罐干预自动降温。按下搅动开关，设定搅动转速并“自动”铁心。

4.3  当罐压接近.5Mpa时关阀V2，渐渐开空气管线A1、A2，空气干预发酵罐，当过滤器冷凝水阀V2排尽冷凝水后就不错关闭。

注：当罐压肃穆后不错将三通阀A3放回“F”位置。

4.4 在降温过程中，历久监视罐压，严禁压力掉。当温度达到工艺条目时，退换搅动转速、空气流量、罐压、标定溶氧电斜率及改良pH电的点。

着重：

1、如另配冷冻水系统消毒后降温请聘任自来水降温（铁心箱左侧板N2开关拨向“W”

2、灭菌完了，请勿关闭蒸气发生器，取样时需要用蒸汽

四、发酵操作

1、准备

1.1  溶氧电标定：将三通阀放回“F”位置，退换空气流量、罐压、搅动转速、罐温（为保证工艺参数的可比，漠视上头四参数保管个固定值），标定溶氧电斜率为

1.2  pH电点改良：温消毒后pH电的点或多或少皆会发生漂移，应预改良。取样诳骗外源pH电精准测定培养基的pH值，字据精准测定值与在线的pH值的差值在标定菜单中径直修改点，使在线值等同于精准测定值。

2、接种

2.1 摇瓶倒种：退换进气量至.2VVM，开排气阀VT1至罐压接近（不得大于.2Mpa），予先旋松接种口，在接种口放好火焰圈并燃烧（在火焰圈中放一丝棉花不错助燃提火焰的度），开接种口，倒入种子，然后旋紧接种盖，立即调罐压。

2.2 差压接种：移种管线消毒：搜检受种阀P4并关紧，开冷凝水阀V4，开种子罐出料阀P2，开移种管线蒸汽阀S3，开移种管线割断阀P3，当阀P1、V4处冷凝水排尽后退换阀P2、V4以有一丝水蒸气排出为宜。消毒3分钟后，关紧阀P2、V4，关紧蒸汽阀S3独立即开受种阀P4，用发酵罐中的空气对移种管线进行保压，等移种管线冷却后就不错移种。

差压移种：调节种子罐与发酵罐的压力，保管种子罐罐压大于发酵罐罐压约.5Mpa，开种子罐底阀P1，种液干预发酵罐。移种完竣须立即关紧受种阀P4，并调发酵罐罐压。移种管线清洗时应避移种管线中的水压于发酵罐罐压，以因受种阀露出致发酵液被浑浊。

2.3 发酵驱动化：在铁心器的发酵罐情状画面输入“发酵批号”再按“就绪”或“起始”并“阐述”，发酵罐数据才智自动保存。设定发酵罐铁心参数及顺应的铁心风景。

3、补料

3.1 将经灭菌消毒的补料瓶及输液瓶舍弃于搁架上，用手动式动掸蠕动泵泵头，将输液管沿蠕动泵动掸向深远蠕动泵内。并用蠕动泵壳内的夹子夹紧软管。

3.2 旋下补料口上闷头，用乙醇棉球对补料口内橡胶塞外名义消毒，然后将针头插入并穿透密封盖，并用补料针上的螺母锁紧。

3.3 开蠕动泵手动开关，使输液管中充满料液。置蠕动泵开对于自动情状。字据发酵工业条目联想铁心式及铁心周期和脉冲。

3.4 酸碱液、消泡剂操作同补料操作。补料式有多种，应字据工艺条目聘任顺应的补料式。

4、取样

4.1 取样器消毒：半开阀P2，开蒸汽阀S3，，蒸气干预取样器，消毒时代5—1分钟

4.2 关闭蒸气阀S3，全开出料阀P2，准备取样。

4.3 逆时针动掸取样阀P1手柄，进行取样。反转手柄，取样完竣。

4.4 开蒸汽阀S3，冲洗取样器，关阀S3。取样完竣。

5、发酵前联想发酵参数（略，详见发酵罐讲明书五章）

6、放料：发酵完竣时务将空气管线三通阀A3置于“S”位置。放料是通过取样口放料，动掸手柄开取样阀即可放料若需网罗菌料操作同取样操作。

7、发酵完竣：发酵完竣后须在铁心器上对发酵情状修改宁德铁皮保温工程，阐述发酵完竣，发酵数据纪录将自动整理并保存并将各铁心参数铁心式改为手动。

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